麦类作物学报

北大核心,CA,JST,CSCD,WJCI

国内刊号:61-1359/S

国际刊号:1009-1041

麦类作物学报杂志2023年第2期:小麦背景中黑麦遗传物质的快速检测方法

发布日期:

作者:张蔚,熊自颖,段延玲,罗涛,罗杰,唐宗祥,符书兰

单位:四川农业大学农学院/四川农业大学植物遗传育种省级重点实验室,四川成都 611130

关键词:小麦,黑麦,易位染色体,寡核苷酸探针,

基金:国家自然科学基金项目(31770373,32070373);四川省重点研发计划项目(2021YFYZ0002)

黑麦(Secale cereale L.)基因资源在小麦(Triticum aestivum L.)品种改良方面具有很大的利用潜力。建立一种高效鉴定小麦背景中黑麦染色体的细胞学标记方法,有利于黑麦优良基因/遗传物质的追溯和高效利用。本研究利用核仁组织区(NOR)核糖体DNA(rDNA)串联重复序列,开发了一种新的寡核苷酸探针Oligo-1RNOR。非变性荧光原位杂交(ND-FISH)试验表明,该探针可专化性识别黑麦1R染色体的NOR区域,并产生强于Oligo-5BL.46的信号。同时,为了提高外源遗传物质细胞学鉴定的效率,建立了一种快速、简便制备小麦间期细胞的方法。利用基于Oligo-1RNOR、Oligo-pSc200和Oligo-pSc250探针的ND-FISH对制备的间期细胞滴片进行分析,结果与中期染色体细胞滴片的FISH结果相同,均能够清楚地判定材料中是否含有黑麦染色体。该方法无需制备中期染色体,叶片和根尖均可用于制备间期细胞,避免了常规细胞学根尖组织制片的预处理和固定程序,为检测小麦背景中的黑麦遗传物质或小麦-黑麦易位染色体提供了更方便的技术手段。本研究建立的方法不足之处在于,要求小麦背景中的黑麦片段必须含有高拷贝数的串联重复序列。

来源:2023年第2期

《麦类作物学报》期刊编辑部

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