麦类作物学报

作者：刘涛，吴保为，李志杰，刘振兰，王倩，赵惠贤

单位：1.西北农林科技大学生命科学学院,陕西杨凌 712100；2.西北农林科技大学旱区作物逆境生物学国家重点实验室,陕西杨凌 712100；3.华南农业大学生命科学学院,广东广州 510642；4.华南农业大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室,广东广州 510642

关键词：小麦, tae-miR5062,靶基因,基因功能,

基金：国家自然科学基金项目（31471481）；农作物种质资源保护项目（2018NWB036-02-1）；西北农林科技大学唐仲英育种基金项目

miRNA作为一种植物中重要的内源小分子，通过调控靶基因的表达来行使其功能。为了探索小麦（Triticum aestivum）中新发现的miRNA tae-miR5062的靶基因，利用生物信息学方法对 tae-miR5062的靶基因进行预测和进一步分析，将属于小麦AGO2家族的 TaAGO2确定为其靶基因；进一步构建重组表达载体pBI121- pre-miR5062和pBI121- TaAGO2，分别转入农杆菌GV3101感受态细胞，然后在烟草叶片上分区注射进行农杆菌介导的烟草瞬时共转化实验。结果表明， tae-miR5062与其靶基因 TaAGO2互作降解，并降低了 TaAGO2的表达。利用实时定量PCR方法检测 TaAGO2在小麦不同组织中的转录水平，结果显示， TaAGO2在小麦根和叶中表达量不高，但在旗叶、茎、穗、籽粒和生长点中都有较高的表达。将C端连有GFP的 TaAGO2融合表达载体转入水稻黄化苗叶鞘的原生质体后瞬时表达的亚细胞定位结果显示， TaAGO2蛋白定位于细胞核和细胞质中；与拟南芥过量表达 TaAGO2的转基因植株相比，野生型对照并无明显的表型。

来源：2021年第1期

《麦类作物学报》期刊编辑部

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