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国内刊号：61-1359/S
国际刊号：1009-1041
发布日期:
作者：张露凡，宋普文，毋柳柳，胡海燕，李成伟
单位：(河南科技学院生命科技学院/河南省植物遗传改良与土壤修复国际联合实验室,河南新乡 453000)
关键词：小麦,赤霉病,酵母双杂交,双分子荧光互补, TaPFT,RT-qPCR, TaFRK,
基金：国家自然科学基金项目（31872129）；河南省科技攻关计划项目（192102110131，192102110030）
小麦赤霉病是全球性病害，严重威胁着中国的小麦粮食安全。目前已经明确的抗赤霉病位点有7个（ Fhb1~ Fhb7）。 其中 Fhb1位点是3BS染色体上稳定性和效应最大的抗扩展位点。 TaPFT是 Fhb1位点上的抗性基因之一，但其抗性机理并不清楚。本研究以TaFRK为诱饵蛋白通过酵母双杂交技术筛选小麦酵母双杂交文库，从而得到互作基因 TaFRK，其编码蛋白为果糖激酶。进一步通过构建酵母双杂交载体和双分子荧光互补载体分析 TaFRK与 TaPFT之间的互作关系，并通过qPCR分析 TaFRK受到禾谷镰刀菌孢子诱导后的表达模式。通过酵母双杂交试验发现，共转pGBKT7 - TaPFT和pGADT7 - TaFRK 的酵母菌株Y2HGlod在含有X-α-Gal和金担子素A（Aureobasidin A,AbA）的四缺培养基SD/-His-Leu-Trp-Ade上长出蓝色菌落，证明 TaFRK与 TaPFT在酵母中互作。通过双分子荧光互补试验发现，在共转YN- TaPFT和YC- TaFRK表达载体的烟草叶片中可观察到强烈的黄色荧光信号，表明 TaFRK与 TaPFT在植物细胞中能够发生相互作用。实时荧光定量PCR分析发现，禾谷镰刀菌孢子侵染抗性小麦后， TaFRK基因表达量升高，说明 TaFRK基因的表达受禾谷镰刀菌侵染诱导。本研究结果对进一步研究 TaPFT的赤霉病抗性机制具有一定的参考 价值。
来源：2021年第11期
《麦类作物学报》期刊编辑部
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