麦类作物学报

作者：王越，姚晓华，吴昆仑，白羿雄，魏晓星

单位：(1.青海大学,青海西宁 810016； 2.青海省青稞遗传育种重点实验室/国家麦类改良中心青海青稞分中心,青海西宁 810016； 3.青海大学生态环境工程学院,青海西宁 810016)

关键词：青稞,HVA1基因,blt4.9基因,内参基因,实时荧光定量PCR,

基金：国家自然科学基金项目(31660388；31160284)；现代农业产业技术体系建设专项(CARS-05)；青海省科技厅项目（2019-ZJ-7075;2017-NK-A7）

为了解青稞 HVA1和 blt4.9基因在抗旱方面的作用及其差异，以青稞品种昆仑12号为材料，利用RT-PCR从8个候选内参基因（ DHN1、 GAPDH、 Actin-1、 Actin-2、 18SrRNA-1、 18SrRNA-2、 TC139057和 PKABA）中筛选出在15%PEG模拟水分胁迫下表达稳定的基因，同时以筛选到的稳定表达的基因为参照，采用qRT-PCR技术研究青稞 HVA1基因和 blt4.9基因在模拟水分胁迫条件下的表达差异及在不同抗旱性青稞品种鉴定中的应用。结果表明：(1)筛选到1个在干旱胁迫下青稞叶片中能稳定表达的内参基因 TC139057 ；(2)在1%～30%PEG模拟干旱胁迫下，随着胁迫时间的延长，青稞 HVA1和 blt4.9基因表达量呈先增后降趋势，25%PEG处理下表达量最高，且在较低浓度PEG处理下基因表达量为 HVA1＞ blt4.9，而在较高浓度PEG处理下反之；(3)15%PEG处理1～144 h，两基因表达量也呈先增后降趋势，胁迫48 h后 HVA1基因表达量最高，胁迫96 h后 blt4.9基因表达量最高，且处理前期基因表达量为 HVA1＞ blt4.9，后期反之；(4) 1～500 μmol·L-1 ABA处理下，两基因表达量仍呈先增后降趋势， HVA1基因比 blt4.9基因敏感，且在较低ABA浓度下基因表达量为 HVA1＞ blt4.9，在较高浓度下反之；(5)获得转青稞 HVA1和 blt4.9基因拟南芥植株，其主要抗旱性生理指标优于野生型；且在较轻胁迫下，转 HVA1植株的生理指标优于转 blt4.9植株，而在较重胁迫处理下情况相反；(6)在模拟水分胁迫下，青稞叶片中两基因的表达量，抗旱性强的显著高于抗旱性弱的材料(P＜0.01)，且较轻胁迫下 HVA1基因较敏感，反之 blt4.9基因敏感。本研究结果为 HVA1和 blt4.9基因在青稞抗旱育种中的应用奠定了基础。

来源：2019年第6期

《麦类作物学报》期刊编辑部

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